一、概念释义:
N蛋白ELISA抗体:又称核衣壳蛋白抗体,是活病毒感染的重要指标,不具有中和病毒的作用,主要用于猪场评估感染压力及稳定性等情况,跟病毒毒力、病毒血症及循环感染有关。目前市场蓝耳病抗体ELISA试剂盒大多检测此抗体为主(IDEXX等)。
GP5、M蛋白ELISA抗体:中和相关抗体,对抗蓝耳病感染有保护作用;检测该抗体的ELISA试剂盒以HIPRA (海博莱)为主。
细胞免疫力:细胞免疫力在抗PRRSV感染过程中发挥着重要作用,可通过评估CD4+细胞、CD8+细胞、γ-干扰素等细胞因子。海泰生物已经建立了用荧光定量PCR检测该类因子的方法。
二、免疫净化的目标
无猪蓝耳病相关临床病例;病原学阴性(RT-PCR阴性),即指猪体内组织、细胞、血液内均没有蓝耳病活病毒(包含疫苗活毒);感染性N蛋白抗体(IDEXX 试剂盒)阴性;中和相关抗体(HIPRA 试剂盒)阳性率达85%以上。
三、免疫净化方案
1、猪群PRRSV感染情况调查评估
1.1血清学评估
母猪群:定位栏采集30头母猪全血(找生产档案有繁殖障碍问题的母猪10头,其他分后备、1-2胎、3-5胎及6胎以上随机各采集5头),检测“N”蛋白抗体和GP5等蛋白相关抗体,进行统计分析 。
商品猪群:采集10日龄、40日龄、70日龄、100日龄全血各5份,检测“N”蛋白抗体和GP5等蛋白相关抗体,进行统计分析 。
1.2病原学评估
采集母猪群、保育猪群及肥猪群唾液、出生仔猪脐带血和阉割仔猪的睾丸渗出液,用RT-PCR的方法检测病毒载量。
评估猪群蓝耳病病毒的感染情况是防控蓝耳病的重要基础,可帮助我们全面了解蓝耳病在猪场的流行情况、传播途径、感染日龄等,从而适当调整接下来的免疫净化方案。
2、免疫净化实施前准备工作
停止猪蓝耳病减毒活疫苗的使用:因部分活疫苗的毒在猪只体内存留时间较长,活疫苗的使用会导致蓝耳病抗原阳性,从而不符合双阴认定标准;停止场外引种,保持猪群稳定,如需引种必须蓝耳病抗原、抗体双阴猪;母猪群在免疫前进行7天左右的保健,以抗应激和控细菌感染为主。
3、免疫方案:全场猪群统一免疫“蓝泰莱”
3.1 基础群:所有公猪、母猪群统一普免蓝泰莱,肌肉注射2.0ml/头;21天后再加强免疫一次蓝泰莱,肌肉注射2.0ml/头(根据猪场蓝耳病感染情况评估结果进行适当调整);以后每3个月免疫一次蓝泰莱,肌肉注射2.0ml/头。
3.2 仔猪群:
14日龄以上哺乳仔猪、保育猪、生长育肥猪,全群统一普免一次蓝泰莱,肌肉注射1.0ml/头,21天后再加强免疫一次蓝泰莱,肌肉注射1.0ml/头。
14日龄以下哺乳仔猪及后续分娩的仔猪,在14日龄、35日龄各免疫1次蓝泰莱,肌肉注射1.0ml/头/次。
后备猪群:肌肉注射2.0ml/头;21天后再加强免疫一次“蓝泰莱”,肌肉注射2.0ml/头;入群前进行抗原评估,阳性淘汰,阴性入群。
4、免疫后评估方案
4.1 临床症状及生产方面的改善。
4.2 病原学的评估:蓝耳病原PCR 检测、流产胎儿样(评估母猪群PRRS是否活跃),野毒阳性者其母猪淘汰;病弱猪组织样(评估是否持续带毒和感染个体),野毒阳性者其母猪淘汰;脐带血(评估胚胎期是否存在感染)、产房仔猪睾丸液(评估初乳是否排毒)。
4.3 免疫血清学评估:
母猪群分别在二免前、二免后30天、三免前采集全血,检测“N”蛋白抗体和GP5抗体,统计分析抗体水平变化。
仔猪群在二免后30天、60天采集全血,检测“N”蛋白抗体和GP5抗体,统计分析抗体水平变化。
四、免疫净化预期结果
1、猪场不发现蓝耳病相关临床问题且蓝耳病抗原检测阴性;
2、猪群“N”蛋白抗体阴性,GP5、M蛋白等中和相关抗体阳性;
3、猪群生产成绩提升,猪场经济效益大幅提高;
4、极大提升猪场竞争力。
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